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小鼠ATP酶（ATPase）ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè)

產(chǎn)品型號(hào)：BS-9409
產(chǎn)品時(shí)間：2024-09-20
簡(jiǎn)要描述：小鼠ATP酶（ATPase）ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè)本生生物公司供應(yīng)：ELISA試劑盒
，動(dòng)物血清
，熒光定量PCR耗材，移液器吸嘴
，微量離心管，進(jìn)口凍存管
，細(xì)胞培養(yǎng)皿
，培養(yǎng)板，培養(yǎng)瓶
，吸頭
，儀器及手套，色譜耗材
，針頭過濾器
。

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

小鼠ATP酶(ATPase)ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè)本生生物公司供應(yīng)：ELISA試劑盒,動(dòng)物血清,熒光定量PCR耗材,移液器吸嘴,微量離心管,進(jìn)口凍存管,細(xì)胞培養(yǎng)皿,培養(yǎng)板,培養(yǎng)瓶,進(jìn)口吸頭,儀器及手套,色譜耗材,針頭過濾器,分光光度計(jì)。

本試劑盒僅供研究使用

檢測(cè)范圍： 96T

使用目的：

本試劑盒用于測(cè)定人血清

、血漿及相關(guān)液體樣本中ATP酶(ATPase)含量

。

實(shí)驗(yàn)原理

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中ATP酶(ATPase)水平。用純化的ATP酶(ATPase)抗體包被微孔板

，制成固相抗體

，往包被單抗的微孔中依次加入ATP酶(ATPase)，再與HRP 標(biāo)記的ATP酶(ATPase)抗體結(jié)合

，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物

，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB 顯色。TMB 在HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色

，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色

。顏色的深淺和樣品中的ATP酶(ATPase)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值)

，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中ATP酶(ATPase)濃度

。

試劑盒組成：

1 30 倍濃縮洗滌液 20ml×1 瓶 ; 2 酶標(biāo)試劑 6ml×1 瓶

3 酶標(biāo)包被板 12 孔×8 條 ; 4 樣品稀釋液 6ml×1 瓶

5 顯色劑A 液 6ml×1 瓶 ; 6 顯色劑B 液 6ml×1/瓶

7 終止液 6ml×1 瓶; 8 標(biāo)準(zhǔn)品(48ng/ml) 0.5ml×1 瓶

9 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 1.5ml×1 瓶; 10 說明書 1 份

11 封板膜 2 張; 12 密封袋 1 個(gè)

標(biāo)本要求

1. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行

，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)

。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)

，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融

2. 不能檢測(cè)含 NaN3 的樣品

，因 NaN3 抑制胎盤核糖核酸抑止劑(HPRI)活性

。

操作步驟

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋

。

60 ng/L5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150µl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

30 ng/L4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150µl 的 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

15 ng/L3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150µl 的 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

7.5 ng/L2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150µl 的 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

3.75 ng/L1 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150µl 的 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

2. 加樣：分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑

，其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔

、待測(cè)樣品孔

。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣 50µl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl

，

然后再加待測(cè)樣品 10µl(樣品終稀釋度為 5 倍)

。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡

量不觸及孔壁

，輕輕晃動(dòng)混勻

。

3. 溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。

4. 配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用

5. 洗滌：小心揭掉封板膜

，棄去液體

，甩干，每孔加滿洗滌液

，靜置 30 秒后棄去

，如此重復(fù) 5 次，拍干

。

6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50µl

，空白孔除外。

7. 溫育：操作同 3

。

8. 洗滌：操作同 5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑 A50µl

，再加入顯色劑 B50µl

，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色

15 分鐘.

10. 終止：每孔加終止液 50µl

，終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)

。

11. 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD 值)

。測(cè)定應(yīng)在加終止液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行

。

小鼠ATP酶(ATPase)ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè)

操作程序總結(jié)：

計(jì)算:

以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD 值為縱坐標(biāo)

，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線

，根據(jù)樣品的OD 值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與 OD 值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式

，將樣品的 OD 值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度

，再乘以稀釋倍數(shù)

，

即為樣品的實(shí)際濃度。

注意事項(xiàng)

1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用

，酶標(biāo)包被板開封后如未用完

，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2. 濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出

，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶

，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。

3. 各步加樣均應(yīng)使用加樣器

，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性

，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在 5 分鐘內(nèi)

，如標(biāo)本數(shù)量多

，推薦使用排槍加樣。

4. 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線

，做復(fù)孔

。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本 OD 值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔孔的 OD 值)，請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測(cè)定

，計(jì)算時(shí)請(qǐng)后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)

。

5. 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染

。6.底物請(qǐng)避光保存

。

7. 嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

8. 所有樣品

，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理

。

9. 本試劑不同批號(hào)組分不得混用。

10. 如與英文說明書有異

，以英文說明書為準(zhǔn)

。

保存條件及有效期

1. 試劑盒保存：;2-8℃。

2. 有效期：6 個(gè)月

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