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大鼠蛋白激酶B(PKB)ELISA試劑盒免費(fèi)代測本生生物公司供應(yīng):ELISA試劑盒,動(dòng)物血清,熒光定量PCR耗材,移液器吸嘴,微量離心管,進(jìn)口凍存管,細(xì)胞培養(yǎng)皿,培養(yǎng)板,培養(yǎng)瓶,進(jìn)口吸頭,儀器及手套,色譜耗材,針頭過濾器。
本試劑盒僅供研究使用
檢測范圍: 96T
使用目的:
本試劑盒用于測定大鼠血清
實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大鼠蛋白激酶B(PKB)水平。用純化的蛋白激酶B(PKB)抗體包被微孔板
試劑盒組成:
1 30 倍濃縮洗滌液 20ml×1 瓶 ; 2 酶標(biāo)試劑 6ml×1 瓶
3 酶標(biāo)包被板 12 孔×8 條 ; 4 樣品稀釋液 6ml×1 瓶
5 顯色劑A 液 6ml×1 瓶 ; 6 顯色劑B 液 6ml×1/瓶
7 終止液 6ml×1 瓶; 8 標(biāo)準(zhǔn)品(48ng/ml) 0.5ml×1 瓶
9 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 1.5ml×1 瓶; 10 說明書 1 份
11 封板膜 2 張; 12 密封袋 1 個(gè)
標(biāo)本要求
1. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取
2. 不能檢測含 NaN3 的樣品
操作步驟
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋
60 ng/L5 號標(biāo)準(zhǔn)品150µl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
30 ng/L4 號標(biāo)準(zhǔn)品150µl 的 5 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
15 ng/L3 號標(biāo)準(zhǔn)品150µl 的 4 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
7.5 ng/L2 號標(biāo)準(zhǔn)品150µl 的 3 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3.75 ng/L1 號標(biāo)準(zhǔn)品150µl 的 2 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)
然后再加待測樣品 10µl(樣品終稀釋度為 5 倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部
量不觸及孔壁
3. 溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘
4. 配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50µl,空白孔除外
。7. 溫育:操作同 3
。8. 洗滌:操作同 5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl
,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15 分鐘.
10. 終止:每孔加終止液 50µl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)
11. 測定:以空白空調(diào)零
大鼠蛋白激酶B(PKB)ELISA試劑盒免費(fèi)代測
操作程序總結(jié):
計(jì)算:
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)
即為樣品的實(shí)際濃度。
大鼠蛋白激酶B(PKB)ELISA檢測試劑盒注意事項(xiàng)
1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用
2. 濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出
3. 各步加樣均應(yīng)使用加樣器
4. 請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染
。6.底物請避光保存。7. 嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8. 所有樣品
,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9. 本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異
,以英文說明書為準(zhǔn)。保存條件及有效期
1. 試劑盒保存:;2-8℃
。2. 有效期:6 個(gè)月
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