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人蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶(PDI)ELISA檢測試劑盒本生生物公司供應(yīng):ELISA試劑盒,血清
貨號:BS-1477
規(guī)格:96T/48T
產(chǎn)品名:人蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶(PDI)ELISA試劑盒
檢測種屬:人
保存條件及有效期:
1、試劑盒保存:2-8℃
2
標(biāo)記物:血清、血漿
【測試種屬】犬
人ELISA試劑盒 人ELISAkit 試劑盒代測 蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶(PDI)
人蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶(PDI)ELISA檢測試劑盒
樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑
3. 尿液:用無菌管收集
,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性
。人蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶(PDI)ELISA試劑盒操作步驟:
人蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶(PDI)ELISA試劑盒組成:
試劑盒組成48 孔配置96 孔配置保存
說明書1 份1 份
封板膜2 片(48)2 片(96)
密封袋1 個1 個
酶標(biāo)包被板1×481×962-8℃保存
標(biāo)準(zhǔn)品:540μg/L0.5ml×1 瓶0.5ml×1 瓶2-8℃保存
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1 瓶1.5ml×1 瓶2-8℃保存
酶標(biāo)試劑3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
樣品稀釋液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
顯色劑 A 液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
顯色劑 B 液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
終止液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
濃縮洗滌液(20ml×20 倍)×1 瓶(20ml×30 倍)×1 瓶2-8℃保存
人蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶(PDI)ELISA試劑盒ELISA測定的影響做如下討論
。血清是常用的ELISA標(biāo)本,血漿一般可視為與血清同等的標(biāo)本
,標(biāo)本引起的假陽性和假陰性結(jié)果主要是干擾性物質(zhì)所致,分為內(nèi)源性物質(zhì)和外源性物質(zhì)兩種:1. 內(nèi)源性物質(zhì) 有人認(rèn)為大約40%的人血清標(biāo)本中含有非特異性干擾物質(zhì)
,可以不同程度影響檢測結(jié)果。常見的干擾物質(zhì)有:類風(fēng)濕因子、補體、嗜異性抗體、嗜靶抗原自身抗體、醫(yī)源性誘導(dǎo)的抗鼠Ig (s)抗體、交叉反應(yīng)物質(zhì)和其它物質(zhì)等。外源性物質(zhì)
2. 外源性物質(zhì)常常是由于用于ELISA測定的血標(biāo)本的采集
、貯存等不當(dāng)所致。如標(biāo)本溶血、標(biāo)本被細(xì)菌污染、標(biāo)本貯存過久、標(biāo)本凝集不全和采血管中添加物等影響。(1)標(biāo)本溶血 由于各種人為原因引起的標(biāo)本溶血
,均可因紅細(xì)胞破壞溶解時釋放出大量具有過氧化物酶活性的血紅蛋白,在以辣根過氧化物酶為標(biāo)記的ELISA測定中,會導(dǎo)致非特異性顯色,干擾測定結(jié)果(2)標(biāo)本受細(xì)菌污染 因菌體中可能含有內(nèi)源性辣根過氧化物酶
(3)標(biāo)本保存不當(dāng) 在冰箱中保存過久的標(biāo)本,血清中IgG可聚合成多聚體
、AFP可形成二聚體,在間接法ELISA測定中會導(dǎo)致本底過深、甚至造成假陽性;標(biāo)本放置時間過長(如一天以上),有時抗原或抗體免疫活性減弱,亦可出現(xiàn)假陰性。為克服上述干擾,ELISA測定的血清標(biāo)本宜為新鮮采集;如不能立即測定,5天內(nèi)測定的血清標(biāo)本可存放于4℃,1周后測定的血清標(biāo)本應(yīng)低溫凍存;凍存后融解的標(biāo)本,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應(yīng)充分混合后再測定,但混勻時應(yīng)輕柔,不可強烈振蕩。(4)標(biāo)本凝集不全 在沒有促凝劑和抗凝劑存在的情況下,正常血液采集后1/2~2h開始凝固
,18~24h*凝固。臨床檢驗工作中,有時為了爭取時間快速檢測,常在血液還未開始凝固時即強行離心分離血清,此時的血清中仍殘留部分纖維蛋白原,在ELISA測定過程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊,易造成假陽性結(jié)果;這類情況于次日復(fù)查時因血凝已*,血清中不再有纖維蛋白原存在,故復(fù)查結(jié)果變?yōu)殛幮?div id="4qifd00" class="flower right">(5)標(biāo)本管中添加物質(zhì)的影響 抗凝劑(如肝素
,EDTA)、酶抑制劑(如NaN3可抑制ELISA系統(tǒng)中辣根過氧化物酶活性)及快速分離血清的分離膠等均對ELISA測定有一定干擾作用。 綜上所述,對臨床檢驗ELISA測定中出現(xiàn)的假陽性或假陰性結(jié)果,在考慮試劑因素和操作因素之外,更多的應(yīng)從標(biāo)本因素方面進(jìn)行分析,并應(yīng)采取相應(yīng)措施排除干擾作用,從而為臨床提供正確可靠的檢測結(jié)果
產(chǎn)品用途:可用于科研實驗,不用于臨床治療
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