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上海小鼠瘦素（LEP）ELISA試劑盒技術(shù)說明書本生生物公司供應(yīng)：ELISA試劑盒,血清
，熒光定量PCR耗材，移液器吸嘴，微量離心管英文名稱：Mouse Leptin,LEP ELISA試劑盒
本試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知待測(cè)物質(zhì)濃度的標(biāo)準(zhǔn)品
貨號(hào)：BS-2619
規(guī)格：96T/48T
產(chǎn)品名：小鼠瘦素（LEP）ELISA試劑盒
檢測(cè)種屬：人
保存條件及有效期：
1
2、有效期：6個(gè)月
標(biāo)記物：血清
【測(cè)試種屬】犬、大小鼠
小鼠ELISA試劑盒 小鼠ELISAkit 試劑盒代測(cè) 瘦素（LEP）
上海小鼠瘦素（LEP）ELISA試劑盒技術(shù)說明書
樣本處理及要求：
1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘
2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后
3. 尿液：用無菌管收集
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集
。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清5. 組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取
7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性
小鼠瘦素（LEP）ELISA試劑盒操作步驟：
小鼠瘦素（LEP）ELISA試劑盒組成：
試劑盒組成48 孔配置96 孔配置保存
說明書1 份1 份
封板膜2 片(48)2 片(96)
密封袋1 個(gè)1 個(gè)
酶標(biāo)包被板1×481×962-8℃保存
標(biāo)準(zhǔn)品：540μg/L0.5ml×1 瓶0.5ml×1 瓶2-8℃保存
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1 瓶1.5ml×1 瓶2-8℃保存
酶標(biāo)試劑3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
樣品稀釋液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
顯色劑 A 液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
顯色劑 B 液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
終止液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
濃縮洗滌液(20ml×20 倍)×1 瓶(20ml×30 倍)×1 瓶2-8℃保存
作步驟：
1. 使用前
2. 根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔
。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。3. 加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔
、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育45分鐘。4. 甩去孔內(nèi)液體
，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作4次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。5. 每孔加入100ul的親和鏈酶素-HRP
，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。6. 甩去孔內(nèi)液體
，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作4次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。7. 每孔加入底物A、B各50ul
8. 取出酶標(biāo)板
，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。9. 在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值
。結(jié) 果 判 斷 與分析：
1
、儀器值：于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y)
，相應(yīng)的指標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X)，做得相應(yīng)的曲線，樣品的含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度, 再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。
產(chǎn)品用途：可用于科研實(shí)驗(yàn),不用于臨床治療！
技術(shù)支持：化工儀器網(wǎng) 管理登陸 網(wǎng)站地圖
