微囊藻毒素(MC)酶聯(lián)免疫分析（ELISA）試劑盒使用說明書
本試劑盒僅供研究使用。
使用目的：
本試劑盒用于測定相關(guān)液體樣本中微囊藻毒素(MC)的含量。
實驗原理
本試劑盒應(yīng)用酶聯(lián)免疫競爭法測定標(biāo)本中微囊藻毒素(MC)水平。用純化的微囊藻毒素
(MC)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中加入微囊藻毒素(MC)
，和
HRP標(biāo)記的微囊藻毒素(MC)抗原，使它們競爭結(jié)合，，經(jīng)過*洗滌后加底物 TMB 顯色。樣本顏色的深淺和樣品中的微囊藻毒素(MC)的含量呈負(fù)相關(guān)。用酶標(biāo)儀在 450nm 波長下測定吸光度（OD 值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中微囊藻毒素(MC)的含量。 試劑盒組成
1
30 倍濃縮洗滌液
20ml×1 瓶
8
標(biāo)準(zhǔn)品 S1（800ng/L）
0.5ml×1 瓶
2
酶標(biāo)試劑
6ml×1 瓶
標(biāo)準(zhǔn)品 S2（400ng/L）
0.5ml×1 瓶
3
酶標(biāo)包被板
12 孔×8 條
標(biāo)準(zhǔn)品 S3（200ng/L）
0.5ml×1 瓶
4
顯色劑 A 液
6ml×1 瓶
標(biāo)準(zhǔn)品 S4（100ng/L）
0.5ml×1 瓶
5
顯色劑 B 液
6ml×1 瓶
標(biāo)準(zhǔn)品 S5（50ng/L）
0.5ml×1 瓶
6
終止液
6ml×1/瓶
9
說明書
1 份
7
樣品稀釋液
6ml×1/瓶
10
封板膜
2 張
標(biāo)本要求
1．標(biāo)本處理：（1）水樣采集后經(jīng) -20℃反復(fù)凍融三次，再經(jīng)玻璃纖維過濾后，備查 （2）組織
樣品用丁醇：甲醇：水(5：25：70 V：V：V)抽提 ，或按相關(guān)文獻(xiàn)提取進(jìn)行
，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗
，可將標(biāo)本放于
-20℃保存 ，備查
2．不能檢測含 NaN3 的樣品，因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性 。
微囊藻毒素(MC)酶聯(lián)免疫分析試劑盒說明書 操作步驟
1.
加樣：分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn)孔 、空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）
、待測樣品孔
。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)孔中加
50 微升，待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl ，然后再加待測樣品
10μl（樣品最終稀釋度為 5 倍） 。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁
，輕輕晃動混勻
。
2.
加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl，空白孔除外 。
3.
溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 60 分鐘 。
4.
配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.
洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體 ，甩干
，每孔加滿洗滌液，靜置
30 秒后棄去 ，如此重復(fù)
5 次 ，拍干。
6.
顯色：每孔先加入顯色劑 A50μl，再加入顯色劑 B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色215 分鐘. 7.
終止：每孔加終止液 50μl，終止反應(yīng)（此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。 8.
測定：以空白孔調(diào)零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。 測定應(yīng)在加終止液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。 計算
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD 值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD 值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與 OD 值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的 OD 值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。 注意事項
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。 2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。 3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在 5 分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。 4． 請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線，最好做復(fù)孔 。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本
OD 值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的 OD 值） ，請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（
n 倍）后再測定 ，計算時請最后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）
。
7．嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。 9．本試劑不同批號組分不得混用。
微囊藻毒素(MC)酶聯(lián)免疫分析試劑盒說明書檢測范圍：
30 ng/L -850 ng/L
規(guī)格：
96 人份/盒
保存條件及有效期
2．有效期：6 個月
服務(wù)熱線： 
