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人維生素B12（VB12）酶聯(lián)免疫分析試劑盒
本試劑盒僅供研究使用
貨號：BS-1522
檢測范圍：
96T
3pg/ml-180pg/ml
使用目的：
本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中維生素B12（VB12）含量
實驗原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人維生素B12（VB12）水平
試劑盒組成
1 30 倍濃縮洗滌液 20ml×1 瓶 7 終止液 6ml×1 瓶 2 酶標(biāo)試劑 6ml×1 瓶 8 標(biāo)準(zhǔn)品(320pg/ml) 0.5ml×1 瓶 3 酶標(biāo)包被板
12 孔×8 條 9 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 1.5ml×1 瓶 4 樣品稀釋液 6ml×1 瓶 10 說明書 1 份 5 顯色劑 A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 張 6 顯色劑 B 液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 個
標(biāo)本要求
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取
2.不能檢測含 NaN3 的樣品
操作步驟
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀 釋
160pg/ml
5 號標(biāo)準(zhǔn)品
150μl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
80pg/ml
4 號標(biāo)準(zhǔn)品
150μl 的 5 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
40pg/ml
3 號標(biāo)準(zhǔn)品
150μl 的 4 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
20pg/ml
2 號標(biāo)準(zhǔn)品
150μl 的 3 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
10pg/ml
1 號標(biāo)準(zhǔn)品
150μl 的 2 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣：分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑
3. 溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘
4. 配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl
7. 溫育：操作同 3
8. 洗滌：操作同 5
9. 顯色：每孔先加入顯色劑 A50μl，再加入顯色劑 B50μl
10 分鐘.
10. 終止：每孔加終止液 50μl，終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)
。11. 測定：以空白孔調(diào)零
，450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應(yīng)在加終止液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行
。操作程序總結(jié)：
計算
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)
，OD 值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的 OD 值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與 OD 值計算出標(biāo) 準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的 OD 值代入方程式，計算出樣品濃度注意事項
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用
2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器
4. 請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線
5. 封板膜只限一次性使用
6.底物請避光保存
7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行
8.所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理
。9.本試劑不同批號組分不得混用
。人維生素B12（VB12）酶聯(lián)免疫分析試劑盒
保存條件及有效期
1.試劑盒保存：;2-8℃。
2.有效期：6 個月
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