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植物1,5-二磷酸核酮糖羧化酶(RubisCO)酶聯(lián)免疫試劑盒說明書
本試劑盒僅供研究使用
。檢測(cè)范圍：
96T
4.5ng/L -160 ng/L
使用目的：
本試劑盒用于測(cè)定植物組織
，細(xì)胞及其它相關(guān)樣本中 1,5-二磷酸核酮糖羧化酶(RubisCO)含量。
實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中植物 1,5-二磷酸核酮糖羧化酶(RubisCO)水平
試劑盒組成
1 30 倍濃縮洗滌液 20ml×1 瓶
7 終止液 6ml×1 瓶 2 酶標(biāo)試劑 6ml×1 瓶
8 標(biāo)準(zhǔn)品(300ng/L) 0.5ml×1 瓶 3 酶標(biāo)包被板 12 孔×8 條
9 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 1.5ml×1 瓶 4 樣品稀釋液 6ml×1 瓶
10 說明書 1 份 5 顯色劑 A 液 6ml×1 瓶
11 封板膜 2 張 6 顯色劑 B 液 6ml×1/瓶
12 密封袋 1 個(gè)
標(biāo)本要求
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取
2.不能檢測(cè)含 NaN3 的樣品，因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性
操作步驟
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支
150ng/L
5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
150μl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
75ng/L
4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
150μl 的 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
37.5ng/L
3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
150μl 的 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
18.75 ng/L
2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
150μl 的 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
9.375 ng/L
1 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
150μl 的 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2. 加樣：分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑
3. 溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘
4. 配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl，空白孔除外
7. 溫育：操作同 3
8. 洗滌：操作同 5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑 A50μl
10 分鐘.
10. 終止：每孔加終止液 50μl
11. 測(cè)定：以空白孔調(diào)零，450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD 值)
操作程序總結(jié)：
計(jì)算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD 值為縱坐標(biāo)
植物1,5-二磷酸核酮糖羧化酶(RubisCO)酶聯(lián)免疫試劑盒說明書
注意事項(xiàng)：
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用
2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器
控制在 5 分鐘內(nèi)
4. 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，最好做復(fù)孔
5. 封板膜只限一次性使用
6.底物請(qǐng)避光保存。
7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行
8.所有樣品
9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用
保存條件及有效期
1.試劑盒保存：;2-8℃
2.有效期：6 個(gè)月
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