本生生物詳述:PCR八聯(lián)管試劑盒的清洗方法及注意實(shí)現(xiàn)!
更新時(shí)間:2020-05-15瀏覽:3369次
PCR八聯(lián)管試劑盒的清洗方法及注意實(shí)現(xiàn)
我們在使用后PCR八聯(lián)管試劑盒需要清洗的
。有一些方法可以清潔PCR八聯(lián)管試劑盒。使用時(shí)應(yīng)注意什么?
實(shí)驗(yàn)方法原理:硅膠膜在高鹽條件下與DNA結(jié)合
,在低鹽條件下與DNA分離。在含有DNA的清洗溶液中分離出引物
、單核苷酸
、酶、礦物油
、鹽離子等,因?yàn)樗鼈兣cDNA沒有相似的性質(zhì)
。
實(shí)驗(yàn)材料:PCR產(chǎn)物
,試劑
,試劑盒
,PCR清潔套件
,儀器
,消耗品
,96孔DNA制備板96孔深孔板96孔V形板
一
、PCR八聯(lián)管廠家談試劑盒的組成
,儲存
,穩(wěn)定性
1
、說明書
,消耗品:96孔DNA制備板
,96孔1.6ml深孔板
,96孔V形板
。
2
、緩沖液PCR-A:DNA結(jié)合溶液
。在室溫下以密封狀態(tài)儲存
。如果發(fā)生沉淀
,應(yīng)將其溶解在65°C的溫浴中
,并在使用前冷卻至室溫
。
3
、緩沖液W2濃縮液:除去鹽溶液。使用前
,根據(jù)瓶子上的體積加入乙醇
,充分混合,并在室溫下保存?div id="jfovm50" class="index-wrap">?梢允褂?00%乙醇或95%無水乙醇。
4.洗脫液:2.5mM Tris-HCl
,pH 8.5,在室溫下以密封狀態(tài)儲存
。
二
、PCR八聯(lián)管廠家談操作步驟
用戶可以選擇負(fù)壓或離心
。
A.負(fù)壓法
1
、正確連接負(fù)壓裝置
,將96孔DNA制備板放在負(fù)壓裝置上;在PCR
,酶消化
,酶標(biāo)記或測序反應(yīng)溶液中加入3倍緩沖液PCR-A(如果緩沖液PCR-A小于100μl
,加入100μl);充分混合并轉(zhuǎn)移至96孔DNA制備板
,打開并調(diào)節(jié)負(fù)壓至-25-30英寸汞柱
,并緩慢吸出板中的溶液
。
2、加入0.3 ml緩沖液W2并吸收溶液
。用相同的方法用0.3ml緩沖液W2洗滌兩次。
確認(rèn)在試劑瓶上的體積的緩沖液W2濃縮物中加入無水乙醇
。
3
、維持負(fù)壓并提取96孔DNA制備板10分鐘。
4
、在長纖維組織上將96孔DNA制備板粉碎6次,引流管朝下
。
5、將96孔DNA制備板置于96孔V形板上
,加入25-30ul水或洗脫至膜中心
,在室溫下靜置1分鐘。通過以3 000×g離心5分鐘洗脫DNA
。
B.離心
1、在PCR
,消化
,酶標(biāo)記或測序反應(yīng)中加入3倍體積的Buffer PCR-A(如果Buffer PCR-A小于100μl,加100μl);混合并轉(zhuǎn)移到制備板96孔中的96孔DNA中
。將DNA制備板置于96孔1.6ml深孔板中
,以1000×g離心1分鐘,棄去濾液
。
2
、在96孔DNA制備板中,加入0.3ml緩沖液W2
,以1000×g離心1分鐘,棄去濾液
。用0.3ml緩沖液W2以相同方式再次洗滌
。確認(rèn)在試劑瓶上的體積的緩沖液W2濃縮物中加入無水乙醇。
3
、將96孔DNA制備板置于96孔1.6ml深孔板中,并以3 000×g離心10分鐘
。
4、將96孔DNA制備板置于干凈的96孔V形底板中
,加入25-30ul水或洗脫至膜中心
,在室溫下靜置1分鐘
。通過以3 000×g離心5分鐘洗脫DNA
。
PCR八聯(lián)管廠家談注意事項(xiàng):
1
、將洗脫液或水加熱至65°C有助于提高洗脫效率
。
2、DNA分子是酸性的
,建議儲存在2.5 mM Tris-HCl
,pH 8.5洗脫液中。
產(chǎn)品優(yōu)勢:本生生物代理實(shí)驗(yàn)室耗材,PCR耗材品種全
,可替代儀器原廠耗材
,性價(jià)比高
,質(zhì)量穩(wěn)定,對用戶可以節(jié)省實(shí)驗(yàn)成本
。
溫馨提示:不可用于臨床治療
。