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人鉤端螺旋體抗體IgM (Lep-IgM)酶聯(lián)免疫分析試劑盒說明書
本試劑僅供研究使用
目的：本試劑盒用于測定人血清
實驗原理：
本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測定標本中人鉤端螺旋體抗體IgM (Lep-IgM)水平
試劑盒組成：
試劑盒組成 | 48孔配置 | 96孔配置 | 保存 |
說明書 | 1份 | 1份 | |
封板膜 | 2片（48） | 2片（96） | |
密封袋 | 1個 | 1個 | |
酶標包被板 | 1×48 | 1×96 | 2-8℃保存 |
標準品：90ng/L | 0.5ml×1瓶 | 0.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
標準品稀釋液 | 1.5ml×1瓶 | 1.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
酶標試劑 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
樣品稀釋液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
顯色劑A液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
顯色劑B液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
終止液 | 3ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
濃縮洗滌液 | （20ml×20倍）×1瓶 | （20ml×30倍）×1瓶 | 2-8℃保存 |
樣本處理及要求：
1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘
2.血漿：應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA、者檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑
3.尿液：用無菌管收集
4.細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集
5.組織標本：切割標本后
，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4操作步驟
1. 標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設(shè)標準品孔10孔，在1
2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑
，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘
。4. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。
5. 洗滌：小心揭掉封板膜
，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外
。7. 溫育：操作同3
。8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl
，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.10. 終止：每孔加終止液50μl
，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）
。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。注意事項：
1． 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完
，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2． 濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶
，洗滌時不影響結(jié)果。3． 各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性
，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4． 請每次測定的同時做標準曲線，做復孔
。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔1孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。5． 封板膜只限一次性使用
，以避免交叉污染。6． 底物請避光保存。
7． 嚴格按照說明書的操作進行
，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8． 所有樣品
，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9． 本試劑不同批號組分不得混用
10. 如與英文說明書有異
計算：
以標準物的濃度為橫坐標
在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的OD
值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度
倍數(shù)
準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值
代入方程式
倍數(shù)，即為樣品的實際濃度
試劑盒性能：
1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.95以上
2.批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于9%和11%
檢測范圍：
2ng/L -70 ng/L
保存條件及有效期：
1.試劑盒保存：；2-8℃
2．有效期：6個月
技術(shù)支持：化工儀器網(wǎng) 管理登陸 網(wǎng)站地圖
