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牛血清淀粉樣蛋白A(SAA)酶聯(lián)免疫分析試劑盒說明書
本試劑僅供研究使用
目的:本試劑盒用于測定牛血清
實(shí)驗(yàn)原理:
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中牛血清淀粉樣蛋白A(SAA)水平
。用純化的牛血清淀粉樣蛋白A(SAA)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入血清淀粉樣蛋白A(SAA),再與HRP標(biāo)記的血清淀粉樣蛋白A(SAA)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的血清淀粉樣蛋白A(SAA)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中牛血清淀粉樣蛋白A(SAA)濃度。試劑盒組成:
試劑盒組成48孔配置96孔配置保存
說明書1份1份
封板膜2片(48)2片(96)
密封袋1個(gè)1個(gè)
酶標(biāo)包被板1×481×962-8℃保存
標(biāo)準(zhǔn)品:22.5μg/mL0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存
酶標(biāo)試劑3 ml×1瓶6 ml×1瓶2-8℃保存
樣品稀釋液3 ml×1瓶6 ml×1瓶2-8℃保存
顯色劑A液3 ml×1瓶6 ml×1瓶2-8℃保存
顯色劑B液3 ml×1瓶6 ml×1瓶2-8℃保存
終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存
濃縮洗滌液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存
牛血清淀粉樣蛋白A(SAA)酶聯(lián)免疫分析試劑盒說明書
樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)
。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑
,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時(shí)
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取
,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性
操作步驟
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔
μl加到第九
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl
10. 終止:每孔加終止液50μl
11. 測定:以空白空調(diào)零
注意事項(xiàng):
1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用
2. 濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出
3. 各步加樣均應(yīng)使用加樣器
4. 請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔
5. 封板膜只限次性使用
6. 底物請避光保存
7. 嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行
8. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理
9. 本試劑不同批號組分不得混用
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。
計(jì)算:
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo)
1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.92以上。
2.批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于9%和15%
牛血清淀粉樣蛋白A(SAA)酶聯(lián)免疫分析試劑盒說明書
保存條件及有效期:
1.試劑盒保存:;2-8℃
2.有效期:6個(gè)月
技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng) 管理登陸 網(wǎng)站地圖