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人環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)elisa試劑盒使用說(shuō)明書
Elisa kit規(guī)格：48孔配置/96孔配置
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液：1.5ml×1瓶
酶標(biāo)試劑：3 ml×1瓶(48)/6 ml×1瓶(96)
【人環(huán)磷酸鳥苷(cGMP) elisa試劑盒】本試劑僅供研究使用
計(jì)算：
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)
，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。試劑盒組成：
封板膜:2片(48)/2片(96)
說(shuō)明書:1份
密封袋:1個(gè)
標(biāo)準(zhǔn)品： 2700ng/L 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存
酶標(biāo)包被板: 1×48 1×96 2-8℃保存
樣品稀釋液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
顯色劑A液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
顯色劑B液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
終止液: 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存
濃縮洗滌液:(20ml×20倍)×1瓶 (20ml×30倍)×1瓶 2-8℃保存
實(shí)驗(yàn)原理：
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人環(huán)磷酸鳥苷(cGMP) 水平
。用純化的人環(huán)磷酸鳥苷(cGMP) 抗體包被微孔板，制成固相抗體目的：本試劑盒用于測(cè)定人血清
，血漿及相關(guān)液體樣本中環(huán)磷酸鳥苷(cGMP) 的含量。服務(wù)承諾：
供貨期：款到發(fā)貨。
工作時(shí)間內(nèi)免費(fèi)的技術(shù)咨詢和指導(dǎo)
。保存條件及有效期：
試劑盒保存：2-8℃| 有效期：6個(gè)月
【人環(huán)磷酸鳥苷(cGMP) elisa試劑盒】樣本處理及要求：
1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘
，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑
，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。3. 尿液：用無(wú)菌管收集
，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集
。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融5. 組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行
，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品
，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟
標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔
，在*、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl，然后在*、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻;然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五加樣：分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同)
溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘
配液：將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。
洗滌：小心揭掉封板膜
加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl
溫育：操作同3
洗滌：操作同5
顯色：每孔先加入顯色劑A50μl
終止：每孔加終止液50μl
測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)
【人環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)elisa試劑盒使用說(shuō)明書】注意事項(xiàng)：
試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存
濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出
各步加樣均應(yīng)使用加樣器
請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線
封板膜只限次性使用
底物請(qǐng)避光保存。
嚴(yán)格按照說(shuō)明書的操作進(jìn)行
所有樣品
本試劑不同批號(hào)組分不得混用
10. 如與英文說(shuō)明書有異
試劑盒性能：
1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.95以上
2.批內(nèi)與批見(jiàn)應(yīng)分別小于9%和11%
檢測(cè)范圍：
0.2IU/L - 6IU/L
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