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ELISA實驗要點：降低ELISA背景的四大要素
在ELISA試劑盒操作中
一、洗滌很重要
洗滌步驟看似很無聊
，其實很重要，因為如果未結(jié)合的材料(如非特異結(jié)合的抗體或檢測試劑)殘留在微孔板中，那么它會增加背景噪音。如有必要，可增加洗滌液中的鹽濃度，這會阻止非特異結(jié)合反應。如果背景過高，而您懷疑洗滌不夠時，可以嘗試增加洗滌次數(shù)二
封閉液的作用是讓不相關(guān)的蛋白占據(jù)微孔板中潛在的結(jié)合位點。這就降低了可產(chǎn)生信號的抗體非特異結(jié)合的機會
如果您一直被背景問題所困擾
常用的非離子型去污劑是Tween-20
蛋白封閉液則有所不同
。它們與開放位點結(jié)合并封閉，同時穩(wěn)定與微孔板結(jié)合的抗原分子。常用的蛋白封閉液包括牛血清白蛋白(BSA)、脫脂奶粉、正常血清和魚明膠。血清組分的內(nèi)在多樣性可使它有效攔截許多不同類型的分子相互作用。不過，它的缺點在于能與Protein A和IgG抗體相互作用。解決這個問題的一種方法是使用雞或魚的正常血清。三
、抗體濃度須優(yōu)化我們通常會follow師兄師姐留下來的操作步驟，但是如果試劑稍有不同
，則可能需要優(yōu)化抗體的量。記住，非特異的抗體結(jié)合會增加背景。為了防止這一點，切勿使用過多的一抗或二抗。四
、檢測試劑要適量另一點也很顯而易見：切勿使用過多的檢測試劑
。如果濃度過高，或者未正確稀釋，則會導致高背景。也不要顯色過度，如有必要如果您的ELISA試劑盒操作中不幸地遇到了高背景，那么也無需太擔心，依次查看ELISA系統(tǒng)中的組分
，并排除可能存在的問題。悉心優(yōu)化，相信很快就會有漂亮的結(jié)果。ELISA試劑盒本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命
，追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經(jīng)營中始終秉承：遵紀守法，嚴于律己，寬仁以待，敢于承擔的企業(yè)精神作為標準，以過硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來維護和拓展市場，較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏，是我們的發(fā)展目標。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作，共創(chuàng)美好的未來。技術(shù)支持：化工儀器網(wǎng) 管理登陸 網(wǎng)站地圖
