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本生帶您快速了解 小鼠ELISA試劑盒的操作要點
更新時間：2023-04-25瀏覽：1076次

　　小鼠ELISA試劑盒的操作要點


　　ELISA的操作因固相載體的形成不同而有所差異

，良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠的必要條件。國內(nèi)醫(yī)學(xué)檢驗一般均用板式點
。本生技術(shù)小編將敘述板式ELISA各個操作步驟的注意要點
，珠式
、管式及磁性球ELSIA，國外試劑均與特殊儀器配合應(yīng)用
，兩者均有詳細(xì)的使用說明，嚴(yán)格遵照規(guī)定操作
，必能得出準(zhǔn)確的結(jié)果
。

　　小鼠ELISA試劑盒操作步驟：

　　方法一 用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:

　　1. 包被：用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg/ml

。在每個聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃過夜
。次日，棄去孔內(nèi)溶液
，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘
。(簡稱洗滌
，下同)。

　　2. 加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中

，置37℃孵育1小時。然后洗滌
。(同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔)
。

　　3. 加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml

。37℃孵育0.5～1小時，洗滌
。

　　4. 加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分鐘

。

　　5. 終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml

。

　　6. 結(jié)果判定：可于白色背景上

，直接用肉眼觀察結(jié)果：小鼠ELISA試劑盒反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強
，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺
，以“+"
、“-"號表示
。也可測O·D值：在ELISA檢測儀上
，于450nm(若以ABTS顯色
，則410nm)處，以空白對照孔調(diào)零后測各孔O·D值
，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍
，即為陽性
。

　　方法二 用于檢測未知抗體的間接法：

　　用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg/ml

，每孔加0.1ml，4℃過夜
。次日洗滌3次。加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時,洗滌
。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)于反應(yīng)孔中
，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml，37℃孵育30-60分鐘
，洗滌,zui后一遍用DDW洗滌
。其余步驟同“雙抗體夾心法"的4
、5
、6
。

　　洗滌：

　　洗滌在ELISA過程中雖不是一個反應(yīng)步驟

，小鼠ELISA試劑盒但卻也決定著實驗的成敗。ELSIA就是靠洗滌來達(dá)到分離游離的和結(jié)合的酶標(biāo)記物的目的
。通過洗滌以清除殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì)，以及在反應(yīng)過程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質(zhì)
。聚苯乙烯等塑料對蛋白質(zhì)的吸附是普遍性的
，而在洗滌時又應(yīng)把這種非特異性吸附的干擾物質(zhì)洗滌下來
。可以說在ELISA操作中
，洗滌是zui主要的關(guān)鍵技術(shù)
，應(yīng)引起操作者的高度重視，操作者應(yīng)嚴(yán)格按要求洗滌
，不得馬虎
。

　　小鼠ELISA試劑盒本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命，追求企業(yè)競爭力的不斷提升

。公司在經(jīng)營中始終秉承：遵紀(jì)守法
，嚴(yán)于律己
，寬仁以待，敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn)
，以過硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來維護(hù)和拓展市場
，較大限度的滿足客戶的需求
。與客戶的共贏
，是我們的發(fā)展目標(biāo)
。本生!您信任的合作伙伴
。我們愿與您真誠合作
，共創(chuàng)美好的未來
。


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