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BUNSEN本生小課堂：ELISA試劑盒測(cè)定與單克隆抗體的效價(jià)關(guān)系
一
、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>1
、深入了解ELISA法測(cè)定抗體效價(jià)的原理。2
、掌握ELISA法測(cè)定單克隆抗體效價(jià)的方法。二、實(shí)驗(yàn)原理
ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ)
，將抗原目前常用的幾種ELISA方法有：測(cè)定抗體的間接法，測(cè)定抗原的雙抗體夾心法和測(cè)定抗原的競(jìng)爭(zhēng)法等
。本實(shí)驗(yàn)采用間接法測(cè)定單克隆抗體效價(jià)。ELISA試劑盒其主要過(guò)程為：首先將已知定量抗原吸附在聚苯乙烯微量反應(yīng)板的凹孔內(nèi)，加待測(cè)抗體，保溫后洗滌以除去未結(jié)合的雜蛋白質(zhì)，加酶標(biāo)抗抗體，保溫后洗滌，加底物保溫30分鐘后，加酸或堿終止酶促反應(yīng)，用目測(cè)或光電比色測(cè)定抗體含量。
三
、操作步驟?div id="d48novz" class="flower left">
?div id="jfovm50" class="index-wrap">、谙礈欤捍稳諆A去凹孔內(nèi)的液體，洗滌液洗3次
?div id="jfovm50" class="index-wrap">、鄯忾]：加l00μL/孔封閉液，室溫放置0.5h.
?div id="jfovm50" class="index-wrap">、芟礈欤河孟礈煲合?次
⑤加待測(cè)樣品(一抗)：將含單克降抗體的細(xì)胞培養(yǎng)上清在另-塊板上用PBS 連續(xù)稀釋(按照1：2或1：10)
?div id="jfovm50" class="index-wrap">、尴礈欤河孟礈煲合?次
⑦加酶標(biāo)抗抗體：兔抗鼠IgG-HRP
?div id="jfovm50" class="index-wrap">、嘞礈欤河孟礈煲合?次，蒸餾水洗2次
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樣品的效價(jià)。
elisa試劑盒本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命
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