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怎樣做有效減少ELISA實(shí)驗(yàn)中背景因素的影響
在ELISA試劑盒操作中
ELISA原理：
一
洗滌步驟看似很無聊
二
、封閉更關(guān)鍵封閉液的作用是讓不相關(guān)的蛋白占據(jù)微孔板中潛在的結(jié)合位點(diǎn)。這就降低了可產(chǎn)生信號的抗體非特異結(jié)合的機(jī)會
。您當(dāng)然也希望抗體只與目的蛋白結(jié)合吧。如果您的背景過高，懷疑封閉不充分，那么您可以嘗試使用更高濃度的封閉液，或適當(dāng)延長封閉時(shí)間。如果您一直被背景問題所困擾
，那么也許您該花些時(shí)間來優(yōu)化封閉液。這可能需要時(shí)間，但也是值得的。目前主要有兩種類型的封閉液：蛋白和非離子型去污劑。您使用的類型須取決于多個(gè)因素，包括微孔板的表面試劑ELISA試劑盒常用的非離子型去污劑是Tween-20
蛋白封閉液則有所不同
，是*的。它們與開放位點(diǎn)結(jié)合并封閉，同時(shí)穩(wěn)定與微孔板結(jié)合的抗原分子。常用的蛋白封閉液包括牛血清白蛋白(BSA)、脫脂奶粉、正常血清和魚明膠。血清組分的內(nèi)在多樣性可使它有效攔截許多不同類型的分子相互作用。不過，它的缺點(diǎn)在于能與Protein A和IgG抗體相互作用。解決這個(gè)問題的一種方法是使用雞或魚的正常血清。三
、抗體濃度須優(yōu)化我們通常會follow師兄師姐留下來的操作步驟，但是如果試劑稍有不同
，則可能需要優(yōu)化抗體的量。記住，非特異的抗體結(jié)合會增加背景。為了防止這一點(diǎn)，切勿使用過多的一抗或二抗。四
、ELISA試劑盒檢測試劑要適量另一點(diǎn)也很顯而易見：切勿使用過多的檢測試劑
。如果濃度過高，或者未正確稀釋，則會導(dǎo)致高背景。也不要顯色過度，如有必要，優(yōu)化一下何時(shí)應(yīng)加入終止液。如果您的ELISA試劑盒操作中不幸地遇到了高背景，那么也無需太擔(dān)心
，依次查看ELISA系統(tǒng)中的組分，并排除可能存在的問題。悉心優(yōu)化，相信很快就會有漂亮的結(jié)果。elisa試劑盒本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命，追求企業(yè)競爭力的不斷提升
。公司在經(jīng)營中始終秉承：遵紀(jì)守法技術(shù)支持：化工儀器網(wǎng) 管理登陸 網(wǎng)站地圖
