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以下是ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中常見(jiàn)問(wèn)題及解決方案的總結(jié)
，天津本生技術(shù)小編結(jié)合實(shí)驗(yàn)操作關(guān)鍵環(huán)節(jié)進(jìn)行分類說(shuō)明：一
溶血/脂血干擾?
現(xiàn)象?：背景值升高或結(jié)果異常
。解決?：血液樣本需靜置1-2小時(shí)后離心(3000×g
反復(fù)凍融影響?
現(xiàn)象?：靶蛋白降解導(dǎo)致信號(hào)減弱
解決?：樣本分裝保存(-20℃或-70℃)
二、?加樣與孵育問(wèn)題?
加樣誤差?
現(xiàn)象?：復(fù)孔差異大(CV>15%)
解決?：使用校準(zhǔn)后的移液器
孵育不充分?
現(xiàn)象?：信號(hào)弱或無(wú)信號(hào)
解決?：確保37℃孵育時(shí)間準(zhǔn)確(誤差±5分鐘)
三
洗板不凈?
現(xiàn)象?：高背景或非特異性結(jié)合
解決?：手工洗板需注滿每孔，靜置1分鐘后甩干;自動(dòng)洗板機(jī)需定期維護(hù)噴頭
洗滌液殘留?
現(xiàn)象?：孔底液體影響OD值
解決?：甩板后倒扣于吸水紙上輕拍。
四、?顯色與檢測(cè)問(wèn)題?
顯色異常?
現(xiàn)象?：顯色過(guò)快(底物污染)或過(guò)慢(酶失活)
解決?：TMB避光保存
標(biāo)準(zhǔn)曲線不佳?
現(xiàn)象?：R2<0.95或線性差
解決?：標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶后渦旋混勻
五
“白板"現(xiàn)象?
原因?：酶標(biāo)抗體失效或漏加
解決?：檢查試劑有效期，按順序添加酶標(biāo)抗體
邊緣效應(yīng)?
原因?：溫育溫度不均
解決?：孵育時(shí)避免疊放板條，確保熱空氣流通
六
試劑管理?：未使用板條需密封保存(含干燥劑)，避免受潮
質(zhì)控設(shè)置?：每板需包含陰/陽(yáng)性對(duì)照和空白孔
設(shè)備校準(zhǔn)?：定期校驗(yàn)酶標(biāo)儀波長(zhǎng)(如450nm±2nm)和移液器精度。
注：若問(wèn)題持續(xù)
注：以上資料僅供參考，具體詳情來(lái)咨詢技術(shù) 老師或品牌供應(yīng)商
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