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牛乳鐵蛋白(LF)酶聯(lián)免疫分析試劑盒說明書
本試劑盒僅供研究使用。
檢測范圍： 96T25μg/mL–850μg/mL
使用目的：本試劑盒用于測定牛血清
，血漿及相關(guān)樣本中乳鐵蛋白(LF)含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中牛乳鐵蛋白(LF)水平。用純化的牛乳鐵蛋白(LF)抗體包被微孔板
，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入乳鐵蛋白(LF)，再與HRP標記的乳鐵蛋白(LF)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物，經(jīng)過洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的乳鐵蛋白(LF)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值)，通過標準曲線計算樣品中乳鐵蛋白(LF)濃度。試劑盒組成
130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液
6ml×1瓶2酶標試劑
6ml×1瓶8標準品(1600μg/mL)
0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液
1.5ml×1瓶4樣品稀釋液
6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液
6ml×1瓶11封板膜2張 6顯色劑B液
6ml×1/瓶12密封袋1個
標本要求
1.標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行
，提取后應(yīng)盡s快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存2.不能檢測含NaN3的樣品
操作步驟
1.標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支
2.加樣：分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同)
、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘
。4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5.洗滌：小心揭掉封板膜
，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶標試劑50μl
，空白孔除外。7.溫育：操作同3
。8.洗滌：操作同5
。9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl
，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘.10.終止：每孔加終止液50μl
11.測定：以空白孔調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)
操作程序總結(jié)：
計算 以標準物的濃度為橫坐標
牛乳鐵蛋白(LF)酶聯(lián)免疫分析試劑盒說明書 注意事項
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完
2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器
4.請每次測定的同時做標準曲線
，最好做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔第一孔的OD值)，請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定，計算時請最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用
6.底物請避光保存
7.嚴格按照說明書的操作進行
8.所有樣品
9.本試劑不同批號組分不得混用。
保存條件及有效期1.試劑盒保存：2-8℃
有效期：6個月
技術(shù)支持：化工儀器網(wǎng) 管理登陸 網(wǎng)站地圖
