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。顏色的深淺和樣品中的胎盤生長因子(PLGF)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測(cè)定吸光度(OD值)，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人胎盤生長因子(PLGF)濃度。

　　試劑盒組成

　　130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液

　　6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑

　　6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品(1600μg/mL)

　　0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

　　1.5ml×1瓶4樣品稀釋液

　　6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液

　　6ml×1瓶11封板膜2張 6顯色劑B液

　　6ml×1/瓶12密封袋1個(gè)

　　標(biāo)本要求

　　1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取

，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡s快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融

　　2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品

，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

　　操作步驟

　　1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支

，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。800μg/mL5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液400μg/mL4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液200μg/mL3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液100μg/mL2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μg/mL1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

　　2.加樣：分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同)

、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。

　　3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘